<code id='D44CBDBF20'></code><style id='D44CBDBF20'></style>
    • <acronym id='D44CBDBF20'></acronym>
      <center id='D44CBDBF20'><center id='D44CBDBF20'><tfoot id='D44CBDBF20'></tfoot></center><abbr id='D44CBDBF20'><dir id='D44CBDBF20'><tfoot id='D44CBDBF20'></tfoot><noframes id='D44CBDBF20'>

    • <optgroup id='D44CBDBF20'><strike id='D44CBDBF20'><sup id='D44CBDBF20'></sup></strike><code id='D44CBDBF20'></code></optgroup>
        1. <b id='D44CBDBF20'><label id='D44CBDBF20'><select id='D44CBDBF20'><dt id='D44CBDBF20'><span id='D44CBDBF20'></span></dt></select></label></b><u id='D44CBDBF20'></u>
          <i id='D44CBDBF20'><strike id='D44CBDBF20'><tt id='D44CBDBF20'><pre id='D44CBDBF20'></pre></tt></strike></i>

          APP推广合作
          联系“鸟哥笔记小乔”
          白肽电荷对其性质肽酪蛋
          2025-05-13 02:09:57

          7、酪蛋体外模拟肽-锌螯合物胃肠消化及锌解离率测定

          将制备的白肽肽-锌螯合物溶于pH2.0,37℃去离子水中,电荷对充分混匀后向其中添加2%(w/w)的性质胃蛋白酶,在37℃条件下水浴摇床酶解2h。酪蛋水解液用分子截留量为500Da的白肽透析袋透析5h,收集透析液,电荷对利用原子吸收分光光度计测定其中游离锌的性质含量,评价肽-锌螯合物在胃消化过程中的酪蛋稳定性,同时收集透析袋内剩余物质冷冻干燥备用。白肽

          将经过胃蛋白酶消化后的电荷对肽-锌螯合物溶于37℃,pH7.0的性质水溶液中,充分混匀后添加2%(w/w)的酪蛋胰酶,在37℃条件下水浴摇床酶解3h。白肽

          随后水解液用分子截留量为500Da的电荷对透析袋透析5h,收集透析液,利用原子吸收分光光度计测定其中游离锌的含量,评价肽-锌螯合物在肠消化过程中的稳定性,同时收集透析袋内剩余物质冷冻干燥备用。

          在模拟胃肠消化过程中,锌的解离率定义为在胃肠消化过程中释放游离锌的量占消化前酪蛋白肽-锌螯合物中锌的总量的百分比。

          8、肽-锌螯合物中锌的生物利用率

          Caco-2细胞培养于25cm2细胞培养瓶中,培养液为含有10%胎牛血清,1%非必须氨基酸,100U/mL青霉素和0.1mg/mL链霉素的高糖培养基。培养条件为37℃,相对湿度90%,CO2浓度为5%。当细胞在培养瓶中分布80%时,用含0.5%EDTA的胰酶消化细胞,然后以4-5×105cells/mL的浓度接种于6孔Transwell培养板中。

          每隔2d换一次培养液,直至细胞培养21d。然后弃去培养液,用HBSS清洗细胞2-3次,在细胞模型上侧和下侧分别添加1.5mL和3mLHBSS溶液。将经胃肠消化后肽一锌螯合物添加至上侧,使其终浓度为1.5mg/mL,随后将添加了样品的Transwell培养板在37℃下吸收转运2h,收集培养板下侧的溶液进行透析,分别收集透析液和透析后的保留物,然后利用原子吸收分光光度计测定其中锌的含量,与吸收之前比较,计算经吸收过程后游离锌的含量及螯合物中锌的生物利用率。

          9、数据处理与统计分析

          数据结果表示为平均值±标准误的形式。采用SPSS19.0(SPSSInc,Chicago,IL)进行数据处理分析,利用Duncan检验分析各组数据见的显著性差异(α=0.05)。

          三、结果与分析

          1、酪蛋白肽的分离纯化


          a1

          酪蛋白水解物经SephadexC25凝胶柱分离后的谱图如图1所示。由图1可知,共分离得到4组酪蛋白肽组分,F1和F2组分是由流动相20mM,pH4.0的醋酸缓冲液洗脱获得;F3和F4组分是由流动相20mM,pH4.0的醋酸缓冲液和0.5MNaCl共同洗脱获得。本实验中分离酪蛋白肽采用的阳离子交换柱层析,以SPsephadexC-25作为固定相,其中以带负电荷的磺酸基(一SO3H)为主要功能团,通过静电相互作用对物质进行分离。因此,F1和F2组分最先被洗脱下来,带有较多的负电荷;F3和F4组分则带有较多正电荷。由于F3和F4组分的洗脱液中含有NaCI,这两组分需要经过脱盐处理。收集足够量的肽组分后,调节pH为7.0,冷冻干燥后在一80℃条件下存放备用。

          2、酪蛋白肽组分的ζ电势


          a2

          分离得到的4组酪蛋白组分的表面电荷性质通过ζ电势进行确定。由图2可知,从F1到F4组分的ζ电势逐渐增加,分别为-43mV,-32mV,-11mV和3mV,且相互之间存在着显著性差异(P<0.05)。这一测定结果与上述酪蛋白肽组分的分离纯化相符合,F1和F2组分带有较多负电荷,ζ电势较低;F3和F4组分最后从SPsephadexC-25阳离子交换填料上洗脱下来,所带负电荷相对较少,因此ζ电势较高。不同的ζ电势表明酪蛋白肽组分在水溶液中稳定性不同,同时也会影响肽与金属离子之间的相互作用以及形成金属螯合物的稳定性。例如,有学者研究发现由于含有较多带负电荷的磷酸基团,酪蛋白磷酸肽在pH变化的条件下仍然能够与铁形成稳定的复合物。因此,由于ζ电势的不同,本实验中分离得到的酪蛋白肽组分螯合锌离子的能力以及形成肽锌螯合物的稳定性会存在较大的差异。

          3、酪蛋白肽组分的氨基酸组成

          活性肽的带电性质在宏观上反映了其氨基酸组成的差异。带有负电荷的组分含有相对较多的酸性氨基酸,而带有正电荷的组分含有相对较多的碱性氨基酸。采用柱前衍生法对分离得到的酪蛋白肽组分的氨基酸组成进行分析,结果如表1所示。F1-F3组分中酸性氨基酸含量高于碱性氨墓酸含量。其中,F1组分中酸性氨基酸(Asp和Glu)含量占总氨基酸含量的42.64%;F2组分中酸性氨基酸含量占33.84%;F3组分中碱性氨基酸(His、Arg、Lys)含量明显高于F1和F2组分,达到15.33%。因此,F1、F2和F3可看做带负电荷的组分,掌电势较低。F4组分中碱性氨基酸含量高于酸性氨基酸含量,碱性氨基酸占氨基酸总数的37.90%。F4为带正电荷组分,亭电势较高。此外,有研究报道,具有结合二价金属离子能力的氨基酸残基包括Asp、Glu、His、Ser、Cys、Asn和Gin,这些氨基酸残基在4组酪蛋白肽组分中的含量分别为55.5%、40.4%、29.4%和26.1%。再结合氨基酸组成分析可知,分离得到的4组酪蛋白肽组分都可以螯合锌离子,并且螯合锌的能力从F1组分到F4组分逐渐减弱。

          a3

          声明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系

          相关链接:胃蛋白酶酪蛋白磺酸基氨基酸

          时尚
          分享到朋友圈
          收藏
          收藏
          评分
          评论

          综合评分:

          我的评分

          参与评论(0)

          社区交流公约

          暂无评论,快来抢沙发吧~
          登录后参与评论
          发布评论
          用户社区交流公约

          Xinstall 15天会员特权
          Xinstall是专业的数据分析服务商,帮企业追踪渠道安装来源、裂变拉新统计、广告流量指导等,广泛应用于广告效果统计、APP地推与CPS/CPA归属统计等方面。
          20羽毛
          立即兑换
          超级nice便签砖
          超级超级超级奈斯!
          1000羽毛
          立即兑换
          【新品】办公/外出两用静音充电小电扇
          办公桌必备小电扇!
          2000羽毛
          立即兑换
          时尚
          发表文章7496
          确认要消耗 羽毛购买
          一个模型两个漏斗做好拉新活动吗?
          考虑一下
          很遗憾,羽毛不足
          我知道了

          我们致力于提供一个高质量内容的交流平台。为落实国家互联网信息办公室“依法管网、依法办网、依法上网”的要求,为完善跟帖评论自律管理,为了保护用户创造的内容、维护开放、真实、专业的平台氛围,我们团队将依据本公约中的条款对注册用户和发布在本平台的内容进行管理。平台鼓励用户创作、发布优质内容,同时也将采取必要措施管理违法、侵权或有其他不良影响的网络信息。


          一、根据《网络信息内容生态治理规定》《中华人民共和国未成年人保护法》等法律法规,对以下违法、不良信息或存在危害的行为进行处理。
          1. 违反法律法规的信息,主要表现为:
              1)反对宪法所确定的基本原则;
              2)危害国家安全,泄露国家秘密,颠覆国家政权,破坏国家统一,损害国家荣誉和利益;
              3)侮辱、滥用英烈形象,歪曲、丑化、亵渎、否定英雄烈士事迹和精神,以侮辱、诽谤或者其他方式侵害英雄烈士的姓名、肖像、名誉、荣誉;
              4)宣扬恐怖主义、极端主义或者煽动实施恐怖活动、极端主义活动;
              5)煽动民族仇恨、民族歧视,破坏民族团结;
              6)破坏国家宗教政策,宣扬邪教和封建迷信;
              7)散布谣言,扰乱社会秩序,破坏社会稳定;
              8)宣扬淫秽、色情、赌博、暴力、凶杀、恐怖或者教唆犯罪;
              9)煽动非法集会、结社、游行、示威、聚众扰乱社会秩序;
              10)侮辱或者诽谤他人,侵害他人名誉、隐私和其他合法权益;
              11)通过网络以文字、图片、音视频等形式,对未成年人实施侮辱、诽谤、威胁或者恶意损害未成年人形象进行网络欺凌的;
              12)危害未成年人身心健康的;
              13)含有法律、行政法规禁止的其他内容;


          2. 不友善:不尊重用户及其所贡献内容的信息或行为。主要表现为:
              1)轻蔑:贬低、轻视他人及其劳动成果;
              2)诽谤:捏造、散布虚假事实,损害他人名誉;
              3)嘲讽:以比喻、夸张、侮辱性的手法对他人或其行为进行揭露或描述,以此来激怒他人;
              4)挑衅:以不友好的方式激怒他人,意图使对方对自己的言论作出回应,蓄意制造事端;
              5)羞辱:贬低他人的能力、行为、生理或身份特征,让对方难堪;
              6)谩骂:以不文明的语言对他人进行负面评价;
              7)歧视:煽动人群歧视、地域歧视等,针对他人的民族、种族、宗教、性取向、性别、年龄、地域、生理特征等身份或者归类的攻击;
              8)威胁:许诺以不良的后果来迫使他人服从自己的意志;


          3. 发布垃圾广告信息:以推广曝光为目的,发布影响用户体验、扰乱本网站秩序的内容,或进行相关行为。主要表现为:
              1)多次发布包含售卖产品、提供服务、宣传推广内容的垃圾广告。包括但不限于以下几种形式:
              2)单个帐号多次发布包含垃圾广告的内容;
              3)多个广告帐号互相配合发布、传播包含垃圾广告的内容;
              4)多次发布包含欺骗性外链的内容,如未注明的淘宝客链接、跳转网站等,诱骗用户点击链接
              5)发布大量包含推广链接、产品、品牌等内容获取搜索引擎中的不正当曝光;
              6)购买或出售帐号之间虚假地互动,发布干扰网站秩序的推广内容及相关交易。
              7)发布包含欺骗性的恶意营销内容,如通过伪造经历、冒充他人等方式进行恶意营销;
              8)使用特殊符号、图片等方式规避垃圾广告内容审核的广告内容。


          4. 色情低俗信息,主要表现为:
              1)包含自己或他人性经验的细节描述或露骨的感受描述;
              2)涉及色情段子、两性笑话的低俗内容;
              3)配图、头图中包含庸俗或挑逗性图片的内容;
              4)带有性暗示、性挑逗等易使人产生性联想;
              5)展现血腥、惊悚、残忍等致人身心不适;
              6)炒作绯闻、丑闻、劣迹等;
              7)宣扬低俗、庸俗、媚俗内容。


          5. 不实信息,主要表现为:
              1)可能存在事实性错误或者造谣等内容;
              2)存在事实夸大、伪造虚假经历等误导他人的内容;
              3)伪造身份、冒充他人,通过头像、用户名等个人信息暗示自己具有特定身份,或与特定机构或个人存在关联。


          6. 传播封建迷信,主要表现为:
              1)找人算命、测字、占卜、解梦、化解厄运、使用迷信方式治病;
              2)求推荐算命看相大师;
              3)针对具体风水等问题进行求助或咨询;
              4)问自己或他人的八字、六爻、星盘、手相、面相、五行缺失,包括通过占卜方法问婚姻、前程、运势,东西宠物丢了能不能找回、取名改名等;


          7. 文章标题党,主要表现为:
              1)以各种夸张、猎奇、不合常理的表现手法等行为来诱导用户;
              2)内容与标题之间存在严重不实或者原意扭曲;
              3)使用夸张标题,内容与标题严重不符的。


          8.「饭圈」乱象行为,主要表现为:
              1)诱导未成年人应援集资、高额消费、投票打榜
              2)粉丝互撕谩骂、拉踩引战、造谣攻击、人肉搜索、侵犯隐私
              3)鼓动「饭圈」粉丝攀比炫富、奢靡享乐等行为
              4)以号召粉丝、雇用网络水军、「养号」形式刷量控评等行为
              5)通过「蹭热点」、制造话题等形式干扰舆论,影响传播秩序


          9. 其他危害行为或内容,主要表现为:
              1)可能引发未成年人模仿不安全行为和违反社会公德行为、诱导未成年人不良嗜好影响未成年人身心健康的;
              2)不当评述自然灾害、重大事故等灾难的;
              3)美化、粉饰侵略战争行为的;
              4)法律、行政法规禁止,或可能对网络生态造成不良影响的其他内容。


          二、违规处罚
          本网站通过主动发现和接受用户举报两种方式收集违规行为信息。所有有意的降低内容质量、伤害平台氛围及欺凌未成年人或危害未成年人身心健康的行为都是不能容忍的。
          当一个用户发布违规内容时,本网站将依据相关用户违规情节严重程度,对帐号进行禁言 1 天、7 天、15 天直至永久禁言或封停账号的处罚。当涉及欺凌未成年人、危害未成年人身心健康、通过作弊手段注册、使用帐号,或者滥用多个帐号发布违规内容时,本网站将加重处罚。


          三、申诉
          随着平台管理经验的不断丰富,本网站出于维护本网站氛围和秩序的目的,将不断完善本公约。
          如果本网站用户对本网站基于本公约规定做出的处理有异议,可以通过「建议反馈」功能向本网站进行反馈。
          (规则的最终解释权归属本网站所有)

          我知道了
          恭喜你~答对了
          +5羽毛
          下一次认真读哦
          成功推荐给其他人
          + 10羽毛
          评论成功且进入审核!审核通过后,您将获得10羽毛的奖励。分享本文章给好友阅读最高再得15羽毛~
          (羽毛可至 "羽毛精选" 兑换礼品)
          好友微信扫一扫
          复制链接